对外泌体的内容物分析常通过高通量测序或蛋白定量质谱等方法，测序是寻找差异表达基因的重要手段，寻找到差异基因，下一步就是对这些差异基因做验证和研究了，首先需要对差异基因做定性定量的验证，目的是确定该基因在特定组织（细胞）来源的外泌体中的表达量与对照有差异；然后再对差异表达基因的功能进行验证，如将基因进行敲除（敲低）、过表达或进行功能回复实验，确定该基因的差异表达与生理或病理状态相关。

1.  实时荧光定量PCR（qPCR）

       实时定量PCR技术于1996年由美国ABI公司推出，由于该技术不仅实现了从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、更能有效的解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，以成为国际公认的核酸分子定量的标准方法。目前最常用的实时定量方法是染料（SYBR Green I）法和TaqMan探针法两种。该技术已经广泛应用于分子生物研究的各个方面，如：DNA定量、RNA定量、SNP分析、基因型分析、RNA变异分析等。

2.  数字PCR（ddPCR）

       数字PCR可以将核酸样品分配到大量独立、平行的微反应单元（纳升级）中，部分反应单元包含靶标分子（阳性），而其他不包含（阴性），接着进行扩增，并利用TaqMan化学试剂或染料标记探针检测靶标序列，能够实现靶标分子的绝对计数，具有特异性强、灵敏度高、绝对定量、准确性好、抗干扰能力强等优点。

3.  荧光素酶报告基因（Luc）

       荧光素酶报告基因（Luc）是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。