植物列表
本公司已开展数百种中草药植物外泌体分离或检测项目,以下为项目中涉及的部分植物名称,列出以供研究参考:
注意事项
1. 外泌体的分离方法:
植物外泌体通常从植物的汁液、培养上清液或组织酶解液中收集。在处理植物组织时,建议避免使用高剪切力的方法(如家用破壁机、中药粉碎机等),因为这些方法可能导致细胞破碎,降低外泌体的纯度。相反,建议采用温和的处理方式:
易出汁植物: 将植物切块后,通过纱布轻柔挤压榨取汁液,然后从汁液中分离外泌体。
难出汁植物: 将植物切成小块,使用植物果胶酶、纤维酶等消化液处理,去除组织碎片后,从上清液中分离外泌体。
组织培养法: 将植物组织或细胞置于适宜的培养基中培养,随后从培养上清液中分离外泌体。
密实组织处理: 对于根部或树干等组织,采用液氮冷冻后研磨的方式进行处理,以提高外泌体的分离效率。
2. 植物来源和保存方式:
植物的来源(如产地、季节、部位)可能影响外泌体的功能特性。为了确保功能实验结果的可靠性和可重复性,建议使用来源一致、新鲜处理且批量制备的植物材料,以满足实验所需的外泌体数量和质量要求。
3. 植物的组学研究方法:
植物外泌体可进行miRNA、lncRNA、mRNA测序,以及蛋白质组学、代谢组学、脂质组学等多种组学研究。当外泌体总量较少时,建议采用微量核酸提取和建库技术。在进行组学分析前,应检索目标植物的拉丁学名,确认是否有可用的数据库支持分析。例如:
若miRNA数据库缺乏,可使用植物总库进行比对;
对于mRNA,可采用de novo组装的方法进行测序;
此外,蛋白质组学分析可借助邻近物种的数据,并结合mRNA转录信息,以提高分析的准确性。
4. 植物外泌体的大规模分离:
对于少量外泌体的提取,可采用组织酶解后超速离心的方法。但若需大量分离外泌体,建议使用大规模分离系统,如基于膜过滤和柱层析的系统,结合切向流浓缩和尺寸排阻技术。本公司已开发了基于陶瓷膜、切向流和层析柱的大规模分离系统,能够单次处理数十升的上清液,适用于植物外泌体的批量制备。
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